PRUEBA MOLECULAR PARA DIABETES MELLITUS

Prueba de hibridación o de secuenciación en Diabetes Mellitus tipo 2

La técnica de hibridacion empleada en Diabetes Mellitus es la tecnica de: Southern El método tipo Southern o Southern blot fue desarrollado para la detección de genes específicos en el ADN celular. El ADN es digerido con una enzima de restricción y los fragmentos son separados por tamaños mediante electroforesis en un gel. A continuación los fragmentos de ADN de doble cadena son desnaturalizados mediante un proceso químico separando las dos hebras componentes del ADN en sus cadenas sencillas. Posteriormente, el ADN inserto en el gel es transferido a un filtro de nitrocelulosa, con lo que en el filtro queda representada una réplica de la disposición de los fragmentos de ADN presentes en el gel. A continuación el filtro se incuba durante un tiempo con la sonda marcada (radiactivamente o con un fluorocromo); durante la incubación la sonda se va hibridando con las moléculas de ADN de cadena sencilla de secuencia complementaria (o muy parecida). La sonda unida al fragmento de ADN complementario se puede visualizar en el filtro de una forma sencilla mediante una exposición a una película de rayos X para el caso de sondas radiactivas o con una película sensible a la luz, para el caso de sondas con fluorocromo.

PROTEINOGRAMA

A partir de un principio analítico general denominado ELISA, se trata de un procedimiento no contaminante y económicamente accesible que mediante la utilización de dos moléculas denominadas GAD e IA-2, en forma recombinante y en cantidades apropiadas.

En los  diabéticos, las células beta  son agredidas por células del sistema inmune, por esto se generan autoanticuerpos específicos para los componentes moleculares de las propias células beta. Estos autoanticuerpos, también denominados “marcadores”, comienzan a reproducirse mucho antes de que la enfermedad se manifieste. El método ELISA desarrollado trabaja mediante la detección de estos marcadores que se encuentran en la sangre, a través de dos autoantígenos recombinantes, algo alterados ex profeso respecto de las moléculas naturales, y que se denominan Trx-GAD e IA-2ic.

  

 

 

Bibliografia:

Guia de practica clinica sobre diabetes mellitus [sede Web] agosto 11 del 2012[ acceso noviembre 22 del 2015] Disponible en:
http://www.guiasalud.es/egpc/diabetes_tipo1/completa/apartado04/definicion.html

Avances en biologia molecular en diabetes mellitus tipo 2. [sede Web] julio 2007 [ acceso noviembre 22 del 2015] Disponible en:
http://repositorio.sibdi.ucr.ac.cr:8080/jspui/bitstream/123456789/1046/1/28026.pdf

PRUEBA DE TAMIZAJE EN DIABETES MELLITUS

ANÁLISIS DE GLUCEMIA COMO PRUEBA PARA EL TRAMIZAJE DE DM

 

La detección y tratamiento temprano de la DM ha demostrado que reduce la carga de sus complicaciones, por lo que su tamizaje podría ser oportuno en personas que tengan factores de riesgo asociados.

El análisis de la glucemia es uno de los varios exámenes que mide la concentración de glucosa en la sangre. Otro es la PTOG. En este apartado nos limitaremos al análisis de la glucemia en periodo post prandial. 

Para definir si el resultado es normal o no, se establecieron escalas o umbrales:

Menor a los 70 ml/dl: si el valor es inferior a 70, se dice que hay hipoglucemia, es decir, el nivel de glucosa en sangre está por debajo de lo normal.

Entre 70 y 110 ml/dl: si el resultado oscila entre estos dos umbrales, entonces la glicemia del paciente es normal.

Entre 110 y 126 ml/dl: este rango recibe el nombre de “glucosa alterada en ayuno”. Puede considerarse que el paciente está en un estado de prediabetes, y existe cierto riesgo de desarrollar diabetes tipo II.

Mayor a los 126 ml/dl: cuando el resultado indica 126 o más miligramos de glucosa en sangre, entonces el médico puede diagnosticar diabetes.

Bibliografía:

http://www.onetouchla.com/dom/vida-diabetes/conoce-diabetes/sobre-diabetes/los-ultimos-estudios-sobre-el-diagn%C3%B3stico-de-la-diabetes 

micro RNA INTERFERENTE EN DIABTES MELLITUS

Los microARN en Biología β -Cell , resistencia a la insulina , Diabetes y sus Complicaciones

Los microARNs (miRNAs) son pequeñas moléculas de ARN 19-23 de nucleótidos que actúan como reguladores de la expresión de proteínas en células eucariotas mediante la inducción de la detención de la traducción y la degradación de los ARN mensajeros.

La falta de insulina es causada principalmente por la ausencia o la destrucción de las células beta pancreáticas, que es impulsado por errores de desarrollo o mal funcionamiento inmunológico, respectivamente. Un gran conjunto de miRNAs se ha implicado en el páncreas (y por tanto de las células β) desarrollo incluyendo miR-15a / b, miR-16, miR-195, el miR-503, miR-541, miR-214 (8) , miR-9, el miR-124a, el miR-7, el miR-376  y miR-375, entre otros.

Recientemente, cambios medidos en la expresión de miRNA de las células T reguladoras de los individuos afectados por T1D. Estas células son de especial interés, ya que son reguladores críticos de la enfermedad autoinmune. Ellos encontraron que miR- 510 se reguló de manera significativa, y miR- 191 y miR- 342 se regulo significativamente en células T periféricas en adultos de pacientes diabéticos en comparación con los individuos sanos. miR- 342 también se conoce para mostrar los perfiles de expresión alterados en enfermedades hematológicas.

La represión de miR-133a y miR-1 en respuesta a los niveles de insulina se ve afectada en pacientes DM2, lo que contribuye al deterioro de la función muscular. De hecho, un estudio reciente ha demostrado que la expresión de miR-133a está fuertemente regulado en este tejido en individuos DT.

Bibliografia:

American Diabetes Asociacion. Los microARN en Biología β -Cell [sede Web] noviembre 11 del 2012[ acceso noviembre 11 2015] Disponible en: http://diabetes.diabetesjournals.org/content/60/7/1825.full.

ALTERACIONES EPIGENETICAS

Alteraciones de la epigenética asociadas  a la diabetes.

La metilación del ADN es un mecanismo importante en la regulación de la transcripción y  expresión de varios genes. Los niveles altos de glucosa e insulina durante el embarazo influyen en el riesgo de desarrollo de DMT2, lo cual sugiere que los patrones de expresión a través de la memoria celular en los tejidos específicos se modifican. Si la DMT2 es consecuencia de una adaptación in útero, obviamente la prevención primaria consiste en proteger el desarrollo fetal. Se deben explorar los mecanismos por los que la desnutrición y el retraso del crecimiento in útero producen cambios en el metabolismo de la glucosa y la insulina a fi n de enfrentar la obesidad y la DMT2.

Estudios demostraron una regulación epigenética del coactivador de PPARγ (PPARGC1A) en los islotes pancreáticos y su efecto en la secreción de insulina en individuos con DMT2. El gen PPARGC1A es un regulador de los genes mitocondriales y su expresión disminuida está relacionada con fallas en la fosforilación oxidativa en el tejido músculo esquelético; también se ha relacionado con fallas en la secreción de insulina (40 %) y el nivel de metilación del promotor del gen al doble cuando ha sido comparado con islotes de individuos no diabéticos.

BIBLIOGRAFIA:
Adán Valladares-Salgado,a Fernando Suárez-Sánchez,a Ana I. Burguete-García,b Miguel Cruza. Epigenética de la obesidad infantil y de la diabetes. Rev Med Inst Mex Seguro Soc. 2014;52(Supl 1):S88-S93. Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2014/ims141o.pdf

 

ALTERACIONES EN TRADUCCION EN DIABETES MELLITUS

Los científicos identifican nuevas regiones genéticas relacionadas con la diabetes tipo 2

Los investigadores del equipo IDIBAPS Programación Genómica de Células Beta y Diabeteshan, han identificado 1.128 genes que codifican ARNlnc, aproximadamente la mitad de los cuales son específicos de las células pancreáticas.

Aunque hace falta profundizar en estos datos, demuestra que al menos uno de estos ARNlnc regula la expresión de un gen íntimamente relacionado con la diabetes llamado GLIS3. Ello indica que al menos algunos de estos genes ARNlnc desempeñan funciones reguladoras. Por otro lado, el ADN que codifica algunos de los ARNlnc se encuentra en zonas del genoma identificadas como zonas que contienen variaciones de la secuencia de ADN que confieren susceptibilidad a desarrollar diabetes. Esto los convierte en potenciales dianas terapéuticas. Finalmente, algunos ARNlnc se producen en cantidades mayores o menores de lo esperado en células beta de personas con diabetes tipo 2.

ARNlnc regula la expresión de un gen íntimamente relacionado con la diabetes llamado GLIS3. Ello indica que al menos algunos de estos genes ARNlnc desempeñan funciones reguladoras. Algunos ARNlnc se producen en cantidades mayores o menores de lo esperado en células beta de personas con diabetes tipo 2.

BIBLIOGRAFIA:

INFOMED. Los científicos identifican nuevas regiones genéticas relacionadas con la diabetes tipo 2 [sede Web]agoto 10 del 2009[ acceso octubre 25 del 2015] Disponible en: http://articulos.sld.cu/diabetes/2012/08/28/los-cientificos-identifican-nuevas-regiones-geneticas-relacionadas-con-la-diabetes-tipo-2/

http://articulos.sld.cu/diabetes/2012/08/28/los-cientificos-identifican-nuevas-regiones-geneticas-relacionadas-con-la-diabetes-tipo-2/

ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCION EN DIABETES MELLITUS

ALTERACIONES EN TRANSCRIPCION EN DIABETES MELLITUS

Los factores de transcripción Hnf1α y Hnf4α tienen funciones relacionadas que afectan al desarrollo de diabetes. Los humanos con mutaciones en genes que codifican los factores de transcripción Hnf1α y Hnf4α desarrollan formas similares de diabetes que conducen a una secreción anormal de insulina. Esto sugiere que ambos factores podrían desarrollar funciones relacionadas en las células productoras de insulina de los islotes pancreáticos.

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Detalles inesperados y sorprendentes acaba de ser realizado por el investigador Karolinska instituted,la investigación se centró en la actividad de diversos genes. Entre ellos: PGC-1 alfa, un factor de transcripción que aumenta la oxidación muscular: TFAM que regula la transcripción del ADN mitocondrial, MEF2A regula el transporte de glucosa dentro y fuera de la célula.

Despues del ejercicio, incluso para aquellos que no practican con regularidad, la estructura del DNA se altera y los genes del metabolismo, luchando contra la diabetes, se expresan más. Los las sorprendente es la velocidad a la que nuestro cuerpo se adapta.

 

Bibliografia:

CELL METABOLISM, DEPORTE, CAMBIO DE ESTRUCTURA DEL ADN PARA COMBATIR DIABETES [sede Web]octubre 30 de 2009[ acceso octubre 17 del 2015] Disponible en: http://www.cell.com/cell-metabolism/abstract/S1550-4131%2804%2900006-3

http://blog.hospitalclinic.org/es/2010/07/factors-de-transcripcio-tenen-funcions-relacionades/